Pengantar Media Kultur Mikroba Umum (I)

Pengantar Media Kultur Mikroba Umum (I)

Media kultur adalah sejenis matriks nutrisi campuran yang dibuat secara artifisial dari berbagai zat sesuai dengan kebutuhan pertumbuhan berbagai mikroba, yang digunakan untuk membiakkan atau memisahkan berbagai mikroorganisme.Oleh karena itu, matriks nutrisi harus mengandung nutrisi (termasuk sumber karbon, sumber nitrogen, energi, garam anorganik, faktor pertumbuhan) dan air yang dapat digunakan oleh mikroorganisme.Bergantung pada jenis mikroorganisme dan tujuan percobaan, ada berbagai jenis dan metode pembuatan media kultur.

Beberapa media kultur umum dalam percobaan diperkenalkan sebagai berikut:

Media agar nutrisi:

Media nutrisi agar digunakan untuk perbanyakan dan kultur bakteri umum, untuk penentuan jumlah bakteri total, pengawetan spesies bakteri dan kultur murni.Bahan utamanya adalah: ekstrak daging sapi, ekstrak ragi, pepton, natrium klorida, bubuk agar, air suling.Pepton dan bubuk daging sapi menyediakan sumber nitrogen, vitamin, asam amino dan karbon, natrium klorida dapat mempertahankan tekanan osmotik yang seimbang, dan agar adalah koagulan media kultur.

Agar nutrisi adalah jenis media kultur paling dasar, yang mengandung sebagian besar nutrisi yang dibutuhkan untuk pertumbuhan mikroba.Agar nutrisi dapat digunakan untuk kultur bakteri rutin.

Media agar darah:

Media agar darah adalah sejenis media pepton ekstrak daging sapi yang mengandung darah hewan yang telah didefibrinasi (umumnya darah kelinci atau darah domba).Oleh karena itu, selain berbagai nutrisi yang dibutuhkan untuk budidaya bakteri, juga dapat menyediakan koenzim (seperti faktor V), heme (faktor X) dan faktor pertumbuhan khusus lainnya.Oleh karena itu, media biakan darah sering digunakan untuk mengolah, mengisolasi dan mengawetkan mikroorganisme patogen tertentu yang membutuhkan nutrisi.

Selain itu, agar darah biasanya digunakan untuk tes hemolisis.Selama proses pertumbuhan, beberapa bakteri dapat menghasilkan hemolysin untuk memecah dan melarutkan sel darah merah.Ketika mereka tumbuh di lempeng darah, cincin hemolitik transparan atau tembus pandang dapat diamati di sekitar koloni.Patogenisitas banyak bakteri terkait dengan karakteristik hemolitik.Karena hemolisin yang diproduksi oleh bakteri berbeda berbeda, kapasitas hemolitiknya juga berbeda, dan fenomena hemolisis pada lempeng darah juga berbeda.Oleh karena itu, uji hemolisis sering digunakan untuk mengidentifikasi bakteri.

Media TCBS:

TCBS adalah media agar sukrosa garam empedu tiosulfat sitrat.Untuk isolasi selektif vibrio patogen.Ekstrak pepton dan ragi digunakan sebagai nutrisi dasar dalam media kultur untuk menyediakan sumber nitrogen, sumber karbon, vitamin dan faktor pertumbuhan lain yang dibutuhkan untuk pertumbuhan bakteri;Konsentrasi natrium klorida yang lebih tinggi dapat memenuhi kebutuhan pertumbuhan vibrio halofilik;Sukrosa sebagai sumber karbon yang dapat difermentasi;Natrium sitrat, lingkungan basa pH tinggi dan natrium tiosulfat menghambat pertumbuhan bakteri usus.Bubuk empedu sapi dan natrium tiosulfat terutama menghambat pertumbuhan bakteri gram positif.Selain itu, natrium tiosulfat juga menyediakan sumber belerang.Di hadapan sitrat besi, hidrogen sulfida dapat dideteksi oleh bakteri.Jika ada bakteri penghasil hidrogen sulfida, endapan hitam akan terbentuk di piring;Indikator media TCBS adalah bromocresol blue dan thymol blue yang merupakan indikator asam basa.Bromocresol blue merupakan indikator asam basa dengan rentang perubahan pH 3,8 (kuning) sampai 5,4 (biru-hijau).Ada dua rentang perubahan warna: (1) rentang asam adalah pH 1,2~2,8, berubah dari kuning menjadi merah;(2) Kisaran alkali adalah pH 8,0~9,6, berubah dari kuning menjadi biru.

Media agar pepton kedelai keju TSA:

Komposisi TSA mirip dengan agar nutrisi.Dalam standar nasional, biasanya digunakan untuk menguji bakteri pengendapan di ruangan bersih (area) industri farmasi.Pilih titik uji di area yang akan diuji, buka pelat TSA dan letakkan di titik uji.Sampel harus diambil saat terpapar udara selama lebih dari 30 menit untuk waktu yang berbeda, dan kemudian dibiakkan untuk penghitungan koloni.Tingkat kebersihan yang berbeda membutuhkan jumlah koloni yang berbeda.

Agar Mueller Hinton:

Media MH adalah media mikroba yang digunakan untuk mendeteksi resistensi mikroorganisme terhadap antibiotik.Ini adalah media non selektif di mana sebagian besar mikroorganisme dapat tumbuh.Selain itu, pati dalam kandungannya dapat menyerap racun yang dikeluarkan oleh bakteri, sehingga tidak akan mempengaruhi hasil operasi antibiotik.Komposisi media MH relatif longgar, yang kondusif untuk difusi antibiotik, sehingga dapat menunjukkan zona hambat pertumbuhan yang jelas.Dalam industri kesehatan China, media MH juga digunakan untuk tes sensitivitas obat.Saat melakukan tes sensitivitas obat untuk beberapa bakteri khusus, seperti Streptococcus pneumoniae, 5% darah domba dan NAD dapat ditambahkan ke media untuk memenuhi kebutuhan nutrisi yang berbeda.

SS agar:

Agar SS biasanya digunakan untuk isolasi selektif dan kultur Salmonella dan Shigella.Ini menghambat bakteri gram positif, sebagian besar coliform dan proteus, tetapi tidak mempengaruhi pertumbuhan salmonella;Natrium tiosulfat dan besi sitrat digunakan untuk mendeteksi pembentukan hidrogen sulfida, membuat pusat koloni berwarna hitam;Merah netral adalah indikator pH.Koloni penghasil asam dari gula yang memfermentasi berwarna merah, dan koloni gula yang tidak memfermentasi tidak berwarna.Salmonella adalah koloni tidak berwarna dan transparan dengan atau tanpa pusat hitam, dan Shigella adalah koloni tidak berwarna dan transparan.